Utilização de hipoclorito de sódio na esterilização de meio de cultura para multiplicação in vitro de Eucalyptus pellita L.

Abstract

Ultimamente, vem-se observando grande interesse na área de pesquisa em cultura de tecidos vegetais, em se descobrir novas opções que resultem na redução dos custos da micropropagação das plantas em laboratórios comerciais, de modo a torná-la mais viável economicamente. Uma opção potencialmente promissora para a redução de custos, mas que não tem recebido a devida atenção, é a perspectiva de se substituir a técnica de autoclavagem por outra mais econômica. Com esse objetivo, foram realizados dois testes utilizando um novo protocolo de preparo do meio, que consistiu na esterilização química de todos os utensílios utilizados no preparo e acondicionamento do meio de cultura, associado à adição do esterilizante ao meio em diferentes concentrações. O primeiro teste teve como objetivo observar a influência de diferentes concentrações de NaClO adicionado ao meio de cultura sobre a esterilização deste. O segundo objetivou verificar a reação dos tecidos de Eucalyptus pellita a diferentes concentrações de NaClO adicionado ao meio de cultura. A adição, ao meio de cultura, de concentrações iguais ou superiores a 0,0005% no primeiro teste e de 0,005% no segundo, permitiu completa esterilização do meio, não se tendo observado qualquer dano aos tecidos do Eucalyptus pellita, quando cultivado em meio de cultura com até a concentração máxima testada, de 0,009% de NaClO. Os resultados obtidos mostraram a viabilidade de dispensar o uso da autoclave para a esterilização de meios de cultura para esta espécie.

Lately it has been observed a great interest in the research area of plant tissue culture in discovering new alternatives leading to cost reduction of the plants produced in commercial laboratories, in order to turn this alternative of plant propagation more economical. A potentially promising alternative for this reduction of costs, but which has not been receiving the due attention, is the possibility of substituting the autoclaving technique to a more economical one. With this purpose, two tests were carried out, using a new protocol of medium preparation, which consisted of the chemical sterilization of all the utensils used in the preparation and packaging of the culture medium as well, associated to the addition of the sterilizing agent to the medium, in different concentrations. The objective of the first test was to observe the influence of different concentrations of NaClO added to the culture medium, on its sterilization. The second test aimed at verifying the reaction of the Eucalyptus pellita tissues to different concentrations of NaClO in the culture medium. The addition of NaClO to the culture medium, equal or higher than 0.0005% in the fist test and of 0.005% in the second one, allowed complete sterilization of the medium, without observing any damage to the Eucalyptus pellita tissues, even when they were grown on culture medium containing up to 0.009%, the maximum concentration tried. The results showed the viability of eliminating the autoclave for the sterilization of culture media.