Cultivo in vitro de Sequoia sempervirens L. em meio de nutritivo esterilizado com hipoclorito de sódio

Abstract

A autoclavagem, técnica utilizada para esterilização de vidraria, meios de cultura e materiais cirúrgicos em laboratório, é uma operação onerosa, em razão do elevado custo do equipamento e do igualmente elevado consumo de energia. Por tais motivos, a substituição dessa técnica de esterilização por outra com custo reduzido, tal como a esterilização química, seria altamente desejável. A presente pesquisa teve como objetivo a comparação entre as técnicas de esterilização de meios de cultura de tecidos vegetais com hipoclorito de sódio e por autoclavagem, em culturas de Sequoia sempervirens, de modo a obter um procedimento menos dispendioso. O teste foi realizado com Sequoia sempervirens em meios de cultura adicionados das seguintes porcentagens (p/v) de hipoclorito de sódio: A) 0%, autoclavado (tratamento-controle A); B) 0,002%; C) 0,003%; D) 0,004%; E) 0,005%; e F) 0%, sem autoclavar (tratamento-controle B). Observou-se que as concentrações de hipoclorito de sódio a partir de 0,003% adicionadas ao meio nutritivo resultaram em uma completa esterilização do meio, bem como em plantas com maiores números e comprimento de ramos.

The autoclaving used for sterilization of glassware, culture media and surgical materials in laboratory is a costly operation, due to the high cost of the equipment and the equally high consumption of energy. For these reasons, the substitution of this sterilization technique for another less costly one, such as chemical sterilization, would be highly desirable. The present study aimed to compare the techniques of sterilization of plant tissue culture media with sodium hypochlorite and that of autoclaving, in Sequoia sempervirens culture, in order to develop a less costly technique in the sterilization of glassware and nutrient media for plant tissue culture. In the trial with Sequoia sempervirens, the concentrations of sodium hypochlorite added to the culture media were (w/v): 0% (autoclaved); B) 0.002%; C) 0.003%; D) 0.004% and E) 0% (without autoclaving). It was observed that the concentrations equal to or higher than 0.003% of total chlorine added to the nutrient media resulted in complete sterilization, as well as in plants with larger numbers and shoots lengths.