Os objetivos deste trabalho foram desenvolver protocolos para a obtenção de plântulas in vitro de P. taeda, avaliar o uso de substratos alternativos e analisar o efeito de tratamentos pré-germinativos na otimização da germinação. Foram testados tratamentos de desinfestação à base de etanol e hipoclorito de sódio (NaOCl), a influência do fotoperíodo, de tratamentos pré-germinativos e a possibilidade de uso de substratos alternativos (amido de milho, papel-filtro, algodão hidrófilo, vermicultita, ágar-água e adição de carvão ativado ao meio nutritivo) na germinação. Foram avaliadas a germinação in vitro e a contaminação fúngica e bacteriana. O melhor tratamento para a desinfestação das sementes foi etanol 70% por 30 s, seguido de imersão em hipoclorito de sódio a 3% por 5 min, no entanto apresentou efeito tóxico. Os substratos alternativos conferem condições físicas adequadas à cultura de tecidos, mas não favorecem a germinação. Contudo, o uso de algodão hidrófilo associado à embebição das sementes por 72 h, na ausência de desinfestação, otimiza a germinação e possibilita a obtenção de plântulas in vitro com baixa contaminação.
The aims of this paper were to develop protocols to obtain in vitro seedlings of P. taeda, evaluate the use of alternative substrates as well as analyze the effect of pre-germinative treatments for optimizing germination. Disinfestation treatments using sodium hypochlorite, influence of photoperiod and pre-germinative treatments, and the possibility of using alternative substrates (maize starch, filter paper, hydrophile cotton, vermiculite, agar-water and addition of activated charcoal into the nutritive medium) were tested for germination. In vitro germination, fungal and bacterial contamination were evaluated. The best seed disinfestation treatment was ethanol at 70 % for 30 seconds + sodium hypochlorite at 3 % for 5 minutes. However, it caused a toxic effect. Alternative substrates provide adequate physical conditions to tissue culture, but do not favor germination. Nevertheless, the use of hydrophile cotton associated with seed soaking for 72 hours, without disinfestation, enhances germination and provides in vitro seedlings with low contamination.