Este trabalho objetivou foi determinar a composição bioquímica de sementes de espécies florestais
e caracterizar a enzima α-galactosidase de sementes germinadas de Platymiscium pubescens. Os maiores teores
de lipídios foram determinados em sementes de Chorisia speciosa, Caesalpinia peltophoroides, Tabebuia serratifolia
e Tabebuia velanedae, enquanto sementes de Enterolobium contortisiliquum, Schizolobium parahyba e Cassia
grandis apresentaram os maiores teores protéicos. A α-galactosidase catalisa a hidrólise dos oligossacarídeos
de rafinose, em sementes de leguminosas, durante a germinação. A maior atividade da α-galactosidase foi detectada
em sementes de Platymiscium pubescens após 72 h de embebição. Duas formas de α-galactosidases, C1 e C2,
foram purificadas de sementes germinadas de P. pubescens, usando-se fracionamento com sulfato de amônio
e cromatografias de filtração em gel e de afinidade. Essas enzimas apresentaram atividade máxima em pH
5,5 e a 50-55 °C. Os valores de K m ap das formas C1 e C2, para o substrato ρ-nitrofenil-α-D-galactopiranosídeo,
foram de 0,54 mM e 0,78 mM, e para a rafinose, de 4,64 mM e 5,09 mM, respectivamente. Essas enzimas
exibiram estabilidade térmica moderada, mantendo 70% da atividade original após 3 h de incubação a 45 °C.
A atividade enzimática da C1 e C2 foi totalmente perdida na presença de CuSO 4 e dodecil sulfato de sódio
(SDS). Tais enzimas também hidrolisaram melibiose, rafinose e estaquiose, indicando potencial para aplicações
biotecnológicas.
The objective of this work was to determine seed biochemical composition of forest species
and to characterize α -galactosidase enzyme of germinated seeds of Platymiscium pubescens. The highest
lipid levels were found in seeds of Chorisia speciosa, Caesalpinia peltophoroides, Tabebuia serratifolia and
Tabebuia velanedae, whereas seeds of Enterolobium contortisiliquum, Schizolobium parahyba and Cassia
grandis showed the highest protein levels. α -galactosidase catalyzes the hydrolyzis of raffinose oligossacarides
in legume seeds during germination. The highest activity of α -galactosidase was found in seeds of Platymiscium
pubescens after 72 h of soaking in the water. Two forms of α -galactosidases, C1 and C2, were purified from
germinated seeds of P. pubescens, using partition with ammonium sulfate, and gel filtration and affinity
chromatographies. These enzymes presented maximum activity at pH 5.5, 50-55°C. K m ap values in the C1
and C2 forms for ρ -nitrophenyl- α -D-galactopyranoside substrate were 0.54 mM and 0.78 mM, and 4.64 mM and 5.09 mM for raffinose, respectively. These enzymes showed moderate thermal stability, maintaining
70% of the original activity after 3 h incubation at 45°C. The C1 and C2 enzymatic activity was totally lost
in the presence of CuSO 4 and sodium dodecyl sulfate (SDS). These enzymes also hydrolyzed melibiose, raffinose
and stachyose, indicating a potential for biotechnological applications.
