Optimization of invertase assay conditions in rubber tree plants (Hevea brasiliensis Muell. Arg.)

Abstract

The objective of this work was to define the optimal conditions for invertase assay, seeking to determine the ideal parameters for the different isoenzymes of leaf and bark tissues in adult rubber trees. Assays of varying pH, sucrose concentration and temperature of the reaction medium were conducted for the two investigated isoenzymes. The results pointed out the existence of two different pH related isoforms for the two analyzed tissues, with an isoenzyme being more active at pH 5,5 and the other at neutral/alkaline pH. Leaf blade isoenzymes presented similar values for substrate concentration, whereas the bark isoenzyme presented maximum values below those previously reported. The assays at different temperatures presented similar values for leaf isoenzymes, though they have differed significantly among the obtained values.

O objetivo deste trabalho foi definir as condições ótimas para a realização do ensaio enzimático da invertase, procurando-se determinar os parâmetros ideais para as diferentes isoenzimas de tecidos foliares e da casca de plantas adultas de seringueira. Foram realizados ensaios variando-se o pH, a concentração da sacarose e a temperatura do meio de reação para as duas isoenzimas estudadas. Os resultados indicaram a existência de duas isoformas diferentes em relação ao pH nos dois tecidos analisados, sendo uma isoenzima mais ativa a pH 5,5 e outra em pH neutro/alcalino. Com relação à concentração do substrato, as isoenzimas da lâmina foliar apresentaram valores semelhantes, enquanto a isoenzima da casca, valores máximos inferiores aos observados anteriormente. Os ensaios conduzidos em diferentes temperaturas tiveram valores semelhantes nas isoenzimas da folha, embora tenham diferido significativamente entre dos valores obtidos.