Chemical sterilization of culture medium: a low cost alternative to in vitro establishment of plants

Abstract

This study aimed at evaluating the in vitro establishment of nodal segments of Eucalyptus benthamii in a non-autoclaved culture medium supplemented with different concentrations of active chlorine (NaClO): P2 - 0.000%, P3 - 0.001%, P4 - 0.003%, P5 - 0.005%, P6 - 0.007% and P7 - 0.010%, v/v. The control consisted of an autoclaved culture medium without active chlorine (P1 - traditional preparation). The percentage of establishment, viable shoots, fungal and bacterial contamination, number of shoots and total shoot length were evaluated after 28 days. The in vitro establishment of nodal segments of E. benthamii was feasible in culture medium supplemented with active chlorine without autoclaving. Concentrations of 0.001% and 0.003% active chlorine produced results most similar to the traditional culture medium. We conclude that treatment with active chlorine is an effective method for tissue culture in Eucalyptus, and has considerable potential to decrease costs and energy expenditure in other plant-culture systems.

Objetivou-se avaliar o estabelecimento in vitro de segmentos nodais de Eucalyptus benthamii em meio de cultura suplementado com diferentes concentrações de cloro ativo (NaClO) visando eliminar a autoclavagem. Para tanto, utilizaram-se concentrações de cloro ativo suplementado ao meio de cultura não autoclavado (P2 - 0,000%, P3 - 0,001%, P4 - 0,003%, P5 - 0,005%, P6 - 0,007% e P7 - 0,010%, v/v). A testemunha constou de meio de cultura autoclavado sem a suplementação de cloro ativo (P1 - preparo tradicional). A porcentagem de estabelecimento, brotações viáveis, contaminação fúngica e bacteriana, número de brotos e comprimento total de brotos foram avaliados aos 28 dias. Como principais resultados, o estabelecimento in vitro de segmentos nodais de E. benthamii foi viável em meio de cultura suplementado com cloro ativo sem autoclavagem, sendo que as concentrações de 0,001% e 0,003% de cloro ativo foram as mais adequadas e assemelharam-se aos resultados do meio de cultura preparado tradicionalmente com autoclavagem, sendo uma importante prática para a redução de gastos energéticos na cultura de tecidos de plantas.