Identificação de marcador molecular associado à expressão sexual em Araucaria angustifolia (Bert) O. Ktze.

Abstract

A Araucaria angustifolia (BERT.) O. KTZE foi uma das espécies nativas mais importante do Sul do Brasil durante o último século. Nos dias de hoje, a área de distribuição da espécie foi reduzida a menos de um por cento de sua área original, no Estado do Paraná. Medidas visando a conservação genética das populações remanescentes estão sendo tomadas. No entanto, estratégias para conservação genética ex situ e incremento de produção de sementes estão sendo limitados por uma série de fatores. Um desses fatores é a dificuldade de se reconhecer a áirvore feminina ou a masculina em fase jovem. Araucária é uma espécie dióica e em populações naturais, sem ações antrópicas, a proporção de árvores masculinas e femininas é de 1:1 (BANDEL E GURGEL, 1967) . A espécie frutifica após 15 a 20 anos de idade e não existem caracteres morfológicos e citogenéticos que possam diferenciar os indivíduos femininos e masculinos na fase jovem. Por esse motivo foi utilizado o método RAPD, o mais citado na literatura para a determinação de sexo em diversas espécies de forma eficiente. Esta dissertação tem por objetivo identificar marcadores moleculares que possam estar associados ao sexo visando sua utilização em programas de melhoramento e conservação genética da espécie. Para isso, foram utilizadas 10 árvores adultas femininas e 10 árvores adultas masculinas amostradas em uma área original, localizada na empresa Celulose Irani S.A. no município de Vargem Bonita - SC. O material vegetativo foi coletado dessas árvores para extração de DNA - Método CTAB, formando dois bulks para a análise de marcadores moleculares (RAPD). Foram utilizados 500 primers visando encontrar o(s) marcador(es) associado(s) a determinação de sexo. No entanto, não foi possível a diferenciação dos sexos utilizando o marcador RAPD. Dos primers testados, 78 apresentaram polimorfismo entre os bulks, no masculino ou no feminino. Quando o mesmo primer foi testado nos indivíduos separadamente, foi observado um polimorfismo em indivíduos. Este projeto foi desenvolvido em parceria com a Embrapa Floresta - Colombo/PR e Embrapa Recursos Tecnológicos - Canoinhas/SC, UEL - Universidade Estadual de Londrina, RIGESA Mead-Westvaco e Celulose Irani S A. e com o apoio financeiro da FLÍPEF/IPGRI (International Plant Genetic Resource Institute).

Araucaria angustifolia (BERT.) O. KTZE was the most important native forest tree species in the Southern Brazil, during the last century. Nowadays the original distribution of this species is reduced to less than one percent in the Parana State. The adoption of strategies for ex situ genetic conservation and improved seed production has been limited by several factors. One of them is the difficulty of recognize the male or female tree in the young ages. It is a diocius species and at its natural range, without human interference, the proportion of male and female trees is 1:1. The species produces seeds only after 15 to 20 years old and, until now, there is no morphologic and citogenetic characters that can differentiate the female and male individuals in the young phase. This project aims to identify molecular markers that can be associate to sex. This study will be based on 20 adult trees (10 male and 10 female) sampled in original area, in Vargem Bonita/SC. The vegetative material, collected from these trees, was used for DNA extraction for analysis of molecular markers (RAPD). The final objective is to establish a protocol for analysis of vegetative material of the araucaria collected from young trees or in any phase of sexual maturation. This project was developed in partnership with Embrapa Forestry Research - Colombo/PR and Embrapa Technological Resources - Canoinhas/SC, UEL - Londrina StateUniversity, RIGESA Mead-Westwaco and Celulose Irani S.A. and financier support by FUPEF/IPGRI (Intenational Plant Genetic Resouces Institute).