Produção de culturas monocarióticas e compatibilidade sexual intra e interpopulacional para o fungo ectomicorrízico Prisolithus tinctorius

Abstract

Basidiosporos de Pisolithus tinctorius, coletados em dois corpos de frutificações maduros (A e B) e procedentes de dois locais distintos reflorestados com Eucaliptus spp, no campus da UFLA, foram colocados para germinar e produzir culturas monocarióticas. Para isso, testaram-se oito condições de tratamentos, formados pelo arranjo fatorial dos seguintes componentes, adicionados ou não ao meio sólido MNM: plântula hospedeira (Eucaliptus camaldulensis - 2 plântulas por placa), acido abiético ( 100 mg-¹) e carvão ativado (0,3 g por placa). Constatou-se o inicio de germinação aos 60 dias após o inicio dos testes, sendo que até aos 120 dias foram obtidas 54 culturas apresentando o estado monocariótico. A eficiência na produção de culturas monocarióticas foi observada somente no tratamento onde os três componentes (planta hospedeira, acido abiético e carvão ativado) estavam simultaneamente presentes, evidenciando uma ação sinergistica entre estes componentes. Essa ação foi responsável pela formação de 75% e 68% das colônias obtidas nas frutificações A (população A) e B (população B), respectivamente. No estudo de compatibilidade sexual- nove colônias monocarióticas, sendo duas da população A e sete da população B, foram pareadas para cruzamento em meio sólido MNVL utilizando o delineamento em meio dialelo. Quatro semanas após os pareamentos, duas pequenas amostras de micélio da interface de contato das colônias pareadas foram transferidas para o meio sólido MNM Quinze dias após a transferência, as colônias cultivadas a partir destas amostras foram microscopicamente analisadas quanto à presença de grampos de conexão celular, os quais foram utilizados como indicação da formação da fase dicariótica. Os resultados destas análises mostraram que as duas populações estudadas possuem grupos de compatibilidade sexual tetrapolar, e que ambas são geneticamente compatíveis, fato que permitiu a obtenção de culturas fúngicas híbridas para serem incorporadas em programas de melhoramento genético do fungo ectomicorrizico P. tinctorius.

Basidiospores of Pisolithus tinctorius from two mature fruit-bodies (A and B) growing on two different sites reforested with Eucaliptus sp. were germinated to produce monocaryotic cultures. To this end, eight treatment conditions were tested, composed by a factorial combination of the following compounds, added or not in MMN agar mediumt host seedling (Eucaltptus camaldulensis - 2 seedlings/dish plate), abietic acid (100 mg-¹) and activated charcoal (0,3 g/dish plate). The spore germination began after 60 days and 54 monocaryotic colonies were obtained before 120 days. The highest germination eficiency was observed only in the treatment where the three compounds were simultaneously added in the MMN agar medium, showing a synergistic action between them. This action promoted the growth of 75% and 68% of monocaryotic colonies from liuit-body A (population A) and B (population B), respectively. In the sexual compatibility study, nine monocaryotic colonies (two from population A and seven from population B) were paired on MMN agar medium using a half diallel mating design. After four weeks, two small samples of myceliurn from interface of paired colonies were transferred to fresh MMN agar medium. After 15 days, the colonies growing from these samples were examined microscopically for the presence of clamp connections which were used to indicate dycan'on formation. These results showed that the sexual compatibility of the two studied P. tinctorius populations are tetrapolar and that they are genetically compatible to produce hybrid cultures for introduction in fungal breeding programs.