O pinhão manso (Jatropha curcas L.) é uma oleaginosa que tem
despertado o interesse de produtores, governos e instituições de pesquisa,
visando o desenvolvimento de tecnologia, como a cultura de tecidos, que
possibilite sua utilização como cultura agroenergética. Inicialmente, estudou-se a
relação de fitorreguladores para calogênese e, a partir deste, estruturou-se a
curva de crescimento dos calos por 16 períodos de cultivo. Para cada período de
cultivo foi determinado o comportamento dos metabólitos primários,
carboidratos: açúcar solúvel total (AST), açúcar redutor (AR) e amido; proteína
e aminoácidos. Foi feita análise ultraestrutural em microscopia eletrônica de
varredura (MEV) e transmissão (MET); avaliando o potencial embriogênico
mediante a dupla coloração Carmim acético (C.A.)/Azul de evans (A.E.) e, por
fim, mensurando a viabilidade celular destas culturas, via trifeniltetrazólio
(CTT). O desenvolvimento dos calos foi promissor em meio MS com 1 mg.L-1
de 2,4-D, o comportamento cinético exibiu 5 fases, exponencial (0-7 dias), linear
(7-14 dias), desaceleração (14-28 dias), estacionária (28-77 dias) e declínio (77-
112 dias), ao final da desaceleração, aos 28 dias, é recomendada a repicagem dos
calos. Carboidratos solúveis e insolúveis não são identificados ao princípio do
cultivo. Na desaceleração, observou-se picos de açúcares solúveis. Ao fim do
cultivo, na fase de declínio detectou-se baixos teores de AST e picos de AR, há
também a identificação do máximo teor de amido. Ao final do declínio há
redução de proteínas e aminoácidos. Pela MEV entre 77 e 90 dias de cultivo,
observou-se a formação de embriões em estágio globular e codiforme, mas estes
não prosseguiram o desenvolvimento. O período de expressão do potencial
embriogênico ocorreu de 21 aos 70 dias de cultivo e o maior índice de
viabilidade no dia da inoculação e posteriormente aos 28 e 35 dias de cultivo. Os
intervalos identificados como positivos pelas ferramentas acima envolveram o
período de 28 dias, portanto as técnicas de MEV, MET, C.A./A.E. e CTT,
respaldaram e confirmam o período de 28 dias como o mais adequado à
repicagem dos calos de J.curcas.
The physic nut (Jatropha curcas L.) is an oilseed crop that has aroused
the interest of producers, governments and research institutions, to develop
technology such as tissue culture, which allows its use as an agro-energy culture.
Initially, we studied the relationship of growth regulators for callus induction,
and from this structured on the curve of growth of callus for 16 growing seasons.
For each growing season was determined the behavior of primary metabolites,
carbohydrates: total soluble sugar (TSS), reducing sugar (RS) and starch protein
and amino acids. It was made ultrastructural analysis in scanning electron
microscopy (SEM) and transmission (TEM), evaluating the embryogenic
potential by double staining carmine acid (CA) / evans blue (EB) and finally,
measuring cell viability of these cultures through triphenyltetrazolium (TTC).
The development of a promising callus on MS medium with 1 mg.L-1 2,4-D, the
kinetic behavior exhibited 5 phases, exponential (0-7 days), linear (7-14 days),
deceleration (14 - 28 days), stationary (28-77 days) and decline (77-112 days) at
the end of deceleration, on the 28 days, it is recommended to transplanting the
callus. Soluble and insoluble carbohydrates are not identified at the beginning of
cultivation. In the deceleration observed peaks of soluble sugars. After
cultivation in the decline phase was detected low levels of AST and peak RS,
there is also the identification of the maximum starch content. At the end of the
decline is the reduction of protein and amino acids. SEM between 77 and 90
days of cultivation, we observed the formation of globular-stage embryos and
codiforme, but these did not continue development. The period of expression of
embryogenic potential occurred 21 to 70 days of cultivation and increased
viability index on the day of inoculation and subsequently at 28 and 35 days of
cultivation. The intervals identified as positive by the tools above involved the
period of 28 days, so the techniques of SEM, TEM, CA / AE and CTT, have
supported and confirmed the 28-day period as the most suitable for transplanting
the callus J.curcas.
