Seleção de fungos degradadores de madeira para uso na destoca biológica de Eucalyptus spp.

Abstract

O eucalipto é a arbórea mais plantada no Brasil, devido ao seu amplo uso e após seu corte, os tocos e raízes que permanecem no local, dificultam o manejo da cultura. Com base nessa necessidade, o objetivo do presente estudo foi avaliar as características fisiológicas e funcionais de fungos basidiomicotas, isolados de campos de reflorestamento de Eucalyptus spp., com vistas à possibilidade do uso destes na destoca natural. Os fungos Pycnoporus sanguineus, Lentinus bertieri, Xylaria sp. e Lentinula edodes e um isolado não identificado foram estudados. No primeiro experimento, avaliou-se a patogenicidade dos mesmos em plantas de eucalipto urograndis (10 meses de idade), através da inoculação de disco de meio de cultura colonizado e não colonizado (Testemunha). As avaliações foram feitas aos 30 e 60 dias após a inoculação, com base no tamanho das lesões internas e externas. No segundo experimento, avaliou-se o crescimento micelial dos fungos P. sanguineus, L. bertieri, Xylaria sp., L. edodes e S. ostrea, em substrato à base de serragem enriquecida com farelos, e em três composições de meios de cultura, Batata-Dextrose-Ágar (BDA); Malte-Ágar (MA) e Serragem-Dextrose-Ágar (SDA), e incubados a 23, 27 e 31oC. No terceiro experimento, avaliou-se a produção das enzimas ligninocelulolíticas lacase e celulase, e outras ligadas à degradação de tecidos vegetais, as proteases, pectinases e lipase, em meios de cultura específicos. No quarto experimento, estudou-se, pelo método “soil block”, a perda de massa (%) de corpos-de-prova de eucalipto urograndis, inoculados com os fungos P. sanguineus, L. bertieri, Xylaria sp. e L. edodes, mantidos sob dois regimes de umidade (50 e 100%), e avaliados aos 30, 60, 90 e 120 após inoculação. Estudaram-se também as características químicas da madeira, após 120 dias da inoculação. No primeiro experimento, verificou-se que as lesões externas das plantas inoculadas com fungos, avaliadas aos 60 dias, diminuíram em relação às lesões avaliadas aos 30 dias; as lesões internas, avaliadas aos 30 e 60 dias, foram menores às lesões das testemunhas. No segundo experimento, observou-se rápida colonização de P. sanguineus e L. bertieri nos substratos à base de serragem enriquecida e no meio SDA, a 27 e 31oC; L. edodes e S. ostrea não cresceram em serragem a 31oC. No terceiro experimento, verificou-se que todos os fungos produziram lacases e celulases; P. sanguineus foi o único a produzir proteases; somente S. ostrea e Xylaria sp. produziram lipases; não detectou-se produção de pectinases somente por Xylaria sp. No quarto experimento, observou-se que na umidade 50%, as perdas de massa da madeira de eucalipto urograndis não foram superiores a 10%, para todos os fungos avaliados; na umidade 100%, as perdas de massa causadas por P. sanguineus e L. bertieri foram de 48,9 e 26%, respectivamente; L. edodes teve o crescimento micelial negativamente afetado nesta umidade e Xylaria sp. causou perda de massa menor que 5%. Através das análises químicas da madeira degradada, observou-se que, em relação à lignina e celulose, na umidade 50%, o consumo pelos fungos ficou na ordem decrescente: P. sanguineus, L. edodes, L. bertieri e Xylaria sp., na umidade 100%, o consumo da lignina, celulose e hemicelulose ficou na ordem decrescente: P. sanguineus, L. bertieri, L. edodes e Xylaria sp.

The Eucalyptus spp. tree is the most planted in Brazil, due to its widespread use and after its use, the stumps and roots that remains in the area, hinder crop management. Based on this need, the purpose of this work was evaluate the physiological and functional characteristics of basidiomycetes fungi, obtained in reforestation fields of Eucalyptus spp., with the possibility of using the fungi in natural stump removal. Pycnoporus sanguineus, Lentinus bertieri, Xylaria sp., Stereum ostrea and a unidentified isolate, were studied. In the first, was evaluate the fungi pathogenicity in eucalipt urograndis plants (10 months old), by means of disk inoculation into culture medium colonized and non-colonized (control) by fungi. Evaluations were performed at 30 and 60 days after inoculation based on the external and internal size of lesions. In experiment 2, the mycelial growth of P. sanguineus, L. bertieri, Xylaria sp., L. edodes and S. ostrea was evaluated in bran and sawdust-based substrate, as well as in three culture media: Potato-Dextrose-Agar (PDA), Malt-Agar (MA) and Sawdust-Dextrose-Agar (SDA), and at three incubation temperatures, at 23, 27 and 31oC. In experiment 3, the production of lignolytic enzymes lacase and cellulase, and other enzymes related to degradation of plant tissues, like protease, pectinases and lipase was assessed in specific culture media. In experiment 4, mass loss (%) and chemical features of eucalipt urograndis wood degraded by the soil block method were evaluated by the P. sanguineus, L. bertieri, Xylaria sp. and L. edodes fungi. Thus, test specimens were inoculated with the fungi and kept under two moisture regimes, 50 and 100%, and incubated at 25 ±2oC. Mass loss was assessed at 30, 60, 90 and 120 days after inoculation. The chemical features of eucalipt urograndis test specimens were only analyzed at 120 days. External lesions of plants inoculated with the fungi, assessed at 60 days, were smaller than the lesions at 30 days. The same behavior was noted for internal lesions at 30 and 60 days. A fast colonization by P. sanguineus and L. bertieri was observed in sawdust substrate and in sawdust-based culture medium, at 27 and 31oC; L. edodes e S. ostrea had no growth in sawdust at 31oC. All fungi produced the enzymes lacase and cellulases; P. sanguineus was the only one that produced proteases; only S. ostrea and Xylaria sp. produced lipases; no pectinases production was detected only by Xylaria sp. In the 50% humidity, the wood eucalypti urograndis mass losses were lower than 10%, for all the evaluated fungi; at 100% humidity, wood mass losses by P. sanguineus and L. bertieri were 48,9 and 26 %, respectively; Xylaria sp. mass loss was less than 5%. Through chemical analysis of decayed wood, it was observed that, in relation to lignin and cellulose, at 50% humidity, consumption by the fungus was in the following order: P. sanguineus, L. edodes, L. bertieri and Xylaria sp. In 100% humidity, the use of lignin, cellulose and hemicelluloses was in descending order: P. sanguineus, L. bertieri, L. edodes and Xylaria sp.