Método de Fehling adaptado: uma ferramenta para analisar açúcares redutores totais em madeira hidrolisada

Abstract

A madeira é composta principalmente por polissacarídeos de celulose (de 40% a 60% da biomassa seca) e hemicelulose (de 20% a 40%) e pela lignina (de 10% a 25%), um polímero polifenólico que proporciona a força estrutural para as plantas (HAMELINCK et al., 2005). Tecnologias para produzir biocombustíveis (como etanol, butanol ou vários hidrocarbonetos) e produtos de química verde provenientes de materiais lignocelulósicos são experiências com avanços significativos no esforço para satisfazer as necessidades de energia global e de substâncias químicas. Converter celulose em etanol envolve dois passos principais: quebrar as longas cadeias das moléculas de celulose em açúcares e fermentá-los para etanol. O uso da cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) é uma técnica mais seletiva e mais sensível. Esta tecnologia possibilita identificar uma variedade maior de carboidratos na amostra. No entanto, métodos cromatográficos são caros e complexos. Outras análises simples (como DNS e o método fenol-sulfúrico) usam reagentes tóxicos. Este estudo visou testar o método de Fehling adaptado, tendo em vista que esta metodologia necessita de ajustes para a matriz em questão, avaliando a eficiência do processo de hidrólise da madeira e a formação de açúcares redutores totais. As adaptações ao método de Fehling foram validadas em quatro situações: i) análises de soluções padrão de glicose e xilose; ii) hidrolisados de polpa de celulose; iii) hidrolisados de madeira na forma de serragem; iv) e de madeira microtomizada. O presente método de Fehling foi adaptado de Meyer e Leygue-Alba (1991). A adaptação da metodologia consistiu em uma redução de escala analítica e um aumento do pH do meio reacional proveniente da hidrólise ácida, antes da reação com a solução cuproalcalina. Esta adaptação visou à aplicação nos estudos de quantificação de açúcares redutores totais provenientes da hidrólise ácida total da madeira. Desta forma, é necessária uma validação da metodologia para verificar se as adaptações podem influenciar nos resultados analíticos, devido à diminuição da amostragem.